Cegrogen胎牛血清A0500-3011（低內毒素）使用說明

1.初次開封胎牛血清如何化凍？

胎牛血清常規儲存溫度為-20℃，如果更加長期保存可以-80℃保存。解凍的時候不建議直接放在常溫中（25-37℃）解凍，很容易產生絮狀沉淀，進而有可能影響血清品質。建議的方式為先由-20/-80℃轉移到4℃解凍，全部為液體后，再由4℃轉移到室溫。在解凍的過程中，需要隨時晃動，使血清內成分和溫度混合均勻，有助于減少沉淀的產生。解凍后，就可以把血清用15 mL或者50 mL無菌離心管分裝凍存啦，可以根據自己使用血清的頻率在4℃存放一管已化凍分裝的血清，方便經常配制培養基，在4℃也不可以存放太久，最好在一個月內用完。解凍后的胎牛血清不可以在37℃或者室溫存放太久，避免血清中重要的細胞生長因子失活而影響細胞狀態。

2.血清的用量

原則上血清添加量不宜太多，通常添加5%、10%、20%。大部分細胞正常培養使用10%的血清濃度，部分細胞原代提取時使用20%血清。具體某一株細胞適應的血清濃度，需要根據細胞特性、實驗目的摸索。

3.胎牛血清什么時候需要熱滅活？

這就涉及到什么是熱滅活。熱滅活一般是以56℃，30 min來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活化，而補體所參與的反應有：溶細胞活性，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。除了這些特殊實驗要求，常規細胞培養需要熱滅活嗎？通常來說，熱滅活對大多數細胞培養都不是必須進行的步驟，經此處理過的血清對細胞的生長作用很小，甚至可能會因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低，沉淀物增多等不好的影響。

4.更換血清的正確步驟。

養細胞的小伙伴經常會遇到同一個細胞需要更換血清的情況。如果將另一款血清配制的培養基直接用于細胞培養，可能會發現以前增殖很快的細胞突然變慢甚至逐漸脫壁死亡了。這種情況下，多數為細胞被以往的培養環境馴化，突然更換一個新的營養環境，哪怕是品質更好的血清，也可能會出現不適應的情況。通常來說，更換血清的時候我們會遵循梯度更換保證細胞可以適應。血清開始使用時，如果是重新復蘇細胞，建議用原培養體系進行細胞復蘇，待細胞狀態恢復后再進行測試。測試時不建議直接100%換成新血清體系進行培養，應按照比例梯度替換。例如，先換液按照新舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后替換。針對一些對培養體系較為敏感的細胞，需進一步細化替換比例。

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胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）和小牛血清（Calf Serum, CS）是兩種常見的生物試劑，廣泛應用于細胞培養和生物學研究。它們的主要區別在于哪些呢？

1、來源

胎牛血清（FBS）：來源于懷孕母牛的胎兒血液。胎牛血清通常是在牛胎兒被取出后，通過心臟穿刺方式收集血液，然后分離血清。

小牛血清（CS）：來源于出生后小牛的血液。通常收集3個月以下的小牛血液，再經過離心分離血清。

2、成分

胎牛血清（FBS）：含有較高濃度的生長因子、激素和低水平的免疫球蛋白。這些成分對細胞培養非常有利，特別是對敏感細胞系的培養。

小牛血清（CS）：含有相對較高的免疫球蛋白和低水平的生長因子。由于小牛已經暴露于外界環境，其血清中的免疫球蛋白水平較高，可能會影響某些實驗結果。

3、使用領域

胎牛血清（FBS）：

廣泛用于各種細胞培養，包括哺乳動物細胞系、干細胞和初級細胞培養。由于其成分比較均勻和豐富的生長因子，它被認為是優質的血清類型。

小牛血清（CS）：多用于培養耐受性較高的細胞系或在不需要高水平生長因子的實驗中使用。也可以用于較低成本的應用或實驗中。

4、價格

胎牛血清（FBS）：

由于其高質量和廣泛的應用，FBS通常比小牛血清貴得多。

小牛血清（CS）：價格相對較低，適用于預算有限的研究項目。

5、優缺點

胎牛血清（FBS）：

優點：成分均勻，生長因子和激素含量高，適用于大多數細胞系。

缺點：價格昂貴，有倫理爭議。

小牛血清（CS）：

優點：價格較低，可用于耐受性細胞系的培養。

缺點：免疫球蛋白含量較高，可能影響某些實驗結果。

6、總結

胎牛血清和小牛血清在成分、來源和應用上有顯著不同。胎牛血清更適合需要高質量培養條件的實驗，而小牛血清則適用于較為耐受的細胞系和成本敏感的實驗。選擇哪種血清需要根據具體的實驗需求、預算和細胞類型來決定。